医疗系学霸 第34节
袁威宏则面色严肃，一边坐下，一边问：“你刚刚所说的，创伤性关节炎一旦骨折就会发生，从哪里听来的？看的文献？”
“嗯，最近在看一些文献，前段时间正好看到过。”方子业回，然后准备往外面去喊病人。
“书也看了不少吧？这个病人，如果是你看门诊，你该怎么对他用药？”袁威宏继续问。
方子业仔细审视了几秒钟，先顿步，右手拉着门把手，做接病人状，但没打开门：“看老爷子目前的情况，还是建议他先进行功能锻炼，不常规治疗性用药。”
“那疼痛呢？”袁威宏穷追不舍问。
“师父，我觉得他这个膝关节的疼痛，并不是因关节炎引起的，可能就是近期的活动性损伤吧。刚刚刘伯不是说了嘛，他本来是要过年前来复查的，前段时间跟着孙子跑，绊了一下，这才提前来。”
“没摔倒，估计是股四头肌牵拉的非骨性损伤。”方子业回。
“理论不错。”
“快成长起来了。”袁威宏用右手的拇指摸了摸下巴，看向方子业的目光，仿佛真像是看个小号。
方子业则是顺手拉开了门，对外喊：“2号病友在吗？2号…”
第52章 努力地挣扎
“你更喜欢临床？”门诊即将结束时，袁威宏看着方子业脸上笑容绽放得比任何时候都开心，便如此问。
三年来，袁威宏几乎很少看到过自己的学生会这么开心。
方子业看着自己刚提升了创伤外科基础理论后，学识点余额再次攀升到22.1！
转头说：“师父，临床和科研我都喜欢，我其实喜欢对未知探索的过程。”
心里默默说，本来这样探索过程中带来的学识点，才是最让我开心的。可久而久之，我发现这个过程，其实也是一种享受。
“晚上你还要去实验室吧？我就不叫你出去吃饭了。”袁威宏看了看手表上的时间，指向了十七点整，距离下班还有半小时。
“嗯，师父，洛师妹transwell小室实验，今天还要去看一下孵养状态。”方子业点了点头，同时侧身往外再看了一眼，确定暂时没有复诊病人在外候着，这才稍稍把门推了一下。
如此更方便说话。
未下班之前的门诊日清闲时间，其实也是值得享受的。
方子业就给袁威宏的一次性茶水杯里，再接了一杯热水。
“上次那种枞树菌，还能搞得到吗？我可以买一点。”袁威宏忽然这么问了一嘴。
“啊？这个季节已经过时了，十月初，是最后一批，现在很难找了，不过我可以帮您问问，师父。”方子业眼皮快速地闪动了几下。
按理说，老师有想吃的东西，这么好的老师，想方设法也得帮个忙。
只是过季节的山货，这还真不是想办法就能搞得到的，若是那种冰冻的，估计口味又没那么好。
“过了就算了，别费神了，我只是随口一问。别往心里去。”
“你更要上心的事情是好好帮着听竹把申请课题的前期研究做好，她属于是非名额内的博士研究生，邓勇教授一开始不同意她来就读，是因为着实课题基金有限。”
“邓勇教授本来收了的学生，再加上新来的博士研究生，肯定要保证他们先毕业，洛听竹如果想要多拿到基金做课题的话，就得她自己稍微努力一下了。”
“这是没办法的事情。其实她如果待内科，挺好的。”袁威宏转移了话题。
方子业则笑着说：“洛师妹可能是看上了我们骨科老师们的强悍肌肉，才来了我们创伤外科。”
袁威宏闻言一怔。
接着恍惚地摸了摸手表，叹了一口气：“如果原生家庭一般的孩子，有时候美貌不是幸运，还是一种原罪。”
“这就是生活啊，一地鸡毛。”
这个话题太过惆怅，方子业很难感同身受，他自己的家庭，是相对幸福的。如今父母还愿意每个月支援两千左右的生活费。
“哦，对了，子业，你如果细胞实验技术操作都比较好的话，所有的实验流程都可以一次到两次就能解决，我们经费本上，是可以节省腾挪出来一丢丢，给你和揭翰两个人，发点劳务费的。”袁威宏对方子业眨了眨眼睛。
方子业若有所思，眼珠子转了一圈。
不管是任何课题资金，给硕士研究生发一丢丢，比如说三五千的劳务费，是正常，合法、合理、合规的支出。
只是一般的经费本，不会多出来这一笔闲钱。毕竟不是每个人的每个实验流程，都可以一步到位。
是需要好几次才能够成功的，除非是熟练度非常高。
但，方子业觉得自己是有那么一丢丢可能多节省一点实验耗材费用的，如此一来，倒还真有可能一年拿个两三千的劳务费。
只是，这样一横向对比，真的是旱的旱死，涝的涝死了。
“谢谢师父。”方子业也不富裕，就不敢有多余想法了。
袁威宏则摆了摆头：“嗯！”
“经费要好好用，精打细算，该节省的地方可以节省，但不该节省的，千万不能省，严格保证无菌原则，移液管虽然贵，但该用就用，保证实验流程的严谨性。”
“省钱不是这么省的，最主要的是要把这个课题的结果做出来，稍微推动一丢丢科学的门缝儿，这就是我们拿着国家给的钱，该做的事情。”
“还有就是，揭翰如今的科研底蕴非常深厚，他申请市级、校级课题起来，与你的底蕴也都差不多，所以他后续啊，也可能会为我们团队多拿一点钱。”
“一个是课题经费，一个是课题数量，这都是好东西。”
“有钱才能好做事。”袁威宏与方子业说着，不能对外道的话。
……
门诊结束，方子业并未多耽搁，帮忙袁威宏放了白大褂后，就直接去了实验室里。
邓勇教授那边的团队虽然大，但洛听竹并不特殊，所以她没有做实验的经费，需要自己去努力，前期研究，既然求到了袁威宏这里，袁威宏还应下来了。
那么方子业作为袁威宏团队里的成员，能帮忙自然要尽量帮忙，否则的话，袁威宏也要亲自来实验室。
而，方子业来到实验室里的时候，就发现，洛听竹一直就守在实验室，从下午的两点一直到下午的六点。
比任何人都要担心实验的进度。
她做申请课题的前期实验的经费都不多，因此容不得丝毫的浪费和大意。
“方师兄，我觉得这个培养皿已经差不多可以计数了，您来看一下？”洛听竹在看到方子业到后，赶紧站起，同时把无菌检查手套、一次性套装口罩等，都已经给方子业备好。
“嗯，好，吃饭了吗？”
“我们要不先点一个外卖？”方子业进来之后，一边问。
“已经点了的，师兄。”洛听竹点头，表示自己的后勤工作做得非常到位。一心只想着细胞宝宝以及实验。
transwell实验后，就是要进行细胞计数，以客观的数据来表示肿瘤细胞的侵袭能力。
因是前期实验，因此只需要用直接计数法即可。
然后，即便是直接计数法，仍需要一定的实验步骤，才能相对客观反应——
先固定好细胞，不再让其移动。
用镊子小心取出小室，吸干上室培养基，用棉签轻轻擦拭matrigel和上室内的细胞。取新的24孔板加入4%多聚甲醛600μl，将小室放入后固定20-30min。
然后再进行细胞染色！
取出小室，吸干上室固定液，移到预先加入约800μl 0.1%-0.2%结晶紫的孔中染液的孔中，染色15-30min。除去未与细胞结合的结晶紫，用棉签轻轻擦拭小室的上侧，将非特异性结合于小室上表面的染料擦掉，以便后续镜检计数……
这一步，方子业非常期待，因为不管是别人的细胞实验，还是自己的，只要自己发现了，而且参与了实验，肯定就有学识点的收益！
两人转战到显微镜前…
*注：本文中涉及到的一些实验步骤，一部分是经简化版本，主要是完全一股脑地放上来，懂的人倒是看懂了，大部分人都没看懂，考虑到大部分书友的感受，大家看个大概即可。
总结：transwell实验是检测肿瘤细胞侵袭能力的，通过技术表示侵袭能力强弱，操作不算简单，但是一种证明能力的工具。
第53章 小爬虫
镜下，透过膜侵袭而下的细胞数量还算喜人。
再对标正常组的话，数量占据了一定优势，已经染色，可以看得出洛听竹处理过的细胞的侵袭性比正常组更强。
这样的现象，代表着洛听竹处理过的细胞宝宝，比正常的细胞宝宝，更具有攻击性。
“学识点+28.6！”
巨额学识点增加闪现时，让方子业颇觉惊愕同时，又感觉是在情理之中。
目前虽然只是前期实验，未成系统性课题，但也是新的方向，也代表着一种突破性的认证新知。
“洛师妹，你的前期实验，就只会做到transwell这一步吧？”
洛听竹此时的注意力完全都在镜中视野，回话的语气略带一丝丝的情绪：“再继续做也没有钱呀？”
可说完，她才意识到这种语气与方子业说不对，毕竟自己没有钱做实验，与方子业没有半毛钱关系。
“方师兄，谢谢啊~”洛听竹转头一笑，大部分的笑靥被遮挡，可巧而灵动的大眼睛和睫毛泛动时，满是和善，代表着它们的主人此刻很开心。
“没事儿，也得谢谢你给我机会练手，总归是没有做坏。”
“那师妹你就先统计数据，我先再去看看我复苏的细胞。”方子业没继续给洛听竹压力，再瞥两眼，没见学识点再有增加，便果断地转战到细胞培养箱。
每一步的实验流程，培养的细胞株，都是实验的原始素材，一旦进入到实验组后，之前的细胞株就成了实验素材，无法再用，需要处理掉，重新开始复苏或者培养。
方子业在做完划痕实验，证明hk2的确在骨巨细胞瘤的转移性中起着一定作用后，接下来仍然要证实的是hk2对骨巨细胞瘤侵袭性的促进作用。
洛听竹继续观察并对细胞进行计数，为申请课题而准备。
前期实验，只是实验的一部分，主要是为表达自己已经做了一部分实验，印证了自己申请课题的可行性，如今就只差钱，就能够得到结果。
但因为个人经济能力有限，无法支撑自己的课题进一步进续，需要得到校级、市级或者省一级甚至国家级的课题基金组的支持。
没有钱，单纯靠自己去做课题，无异于痴人说梦。
不管哪一种实验，实验的素材比如细胞以及要养的老鼠兔子等，比研究生本人的每月花费还要多，除非家财万贯，否则怎么可能负担得起？
一般而言，很多高校，在做人才引进时，都会提及一笔不菲的科研启动资金，这就是让你可以有钱做申请大型课题的前期研究的准备。
研究启动资金，是非常必要的，否则的话，你无法走进这个殿堂。
巧妇难为无米之炊。
洛听竹，其实也是被邓勇教授给他挪了一丢丢的研究启动资金，才让她得以做出目前的前期研究，然后以邓勇教授或者谁的名义，申请一个小课题，拿到钱，做一些基础实验，累厚自己的履历，以求证明自己的科研能力，为留院做准备。
而与洛听竹比起来，方子业这样，找一个年轻导师，在找工作上不占据任何优势的硕士研究生，一旦能够留院读博，那么年轻导师已经申请到了面上课题基金，或者青年基金，就是方子业可以大造特造的经济支柱。
“嗯，最近在看一些文献，前段时间正好看到过。”方子业回，然后准备往外面去喊病人。
“书也看了不少吧？这个病人，如果是你看门诊，你该怎么对他用药？”袁威宏继续问。
方子业仔细审视了几秒钟，先顿步，右手拉着门把手，做接病人状，但没打开门：“看老爷子目前的情况，还是建议他先进行功能锻炼，不常规治疗性用药。”
“那疼痛呢？”袁威宏穷追不舍问。
“师父，我觉得他这个膝关节的疼痛，并不是因关节炎引起的，可能就是近期的活动性损伤吧。刚刚刘伯不是说了嘛，他本来是要过年前来复查的，前段时间跟着孙子跑，绊了一下，这才提前来。”
“没摔倒，估计是股四头肌牵拉的非骨性损伤。”方子业回。
“理论不错。”
“快成长起来了。”袁威宏用右手的拇指摸了摸下巴，看向方子业的目光，仿佛真像是看个小号。
方子业则是顺手拉开了门，对外喊：“2号病友在吗？2号…”
第52章 努力地挣扎
“你更喜欢临床？”门诊即将结束时，袁威宏看着方子业脸上笑容绽放得比任何时候都开心，便如此问。
三年来，袁威宏几乎很少看到过自己的学生会这么开心。
方子业看着自己刚提升了创伤外科基础理论后，学识点余额再次攀升到22.1！
转头说：“师父，临床和科研我都喜欢，我其实喜欢对未知探索的过程。”
心里默默说，本来这样探索过程中带来的学识点，才是最让我开心的。可久而久之，我发现这个过程，其实也是一种享受。
“晚上你还要去实验室吧？我就不叫你出去吃饭了。”袁威宏看了看手表上的时间，指向了十七点整，距离下班还有半小时。
“嗯，师父，洛师妹transwell小室实验，今天还要去看一下孵养状态。”方子业点了点头，同时侧身往外再看了一眼，确定暂时没有复诊病人在外候着，这才稍稍把门推了一下。
如此更方便说话。
未下班之前的门诊日清闲时间，其实也是值得享受的。
方子业就给袁威宏的一次性茶水杯里，再接了一杯热水。
“上次那种枞树菌，还能搞得到吗？我可以买一点。”袁威宏忽然这么问了一嘴。
“啊？这个季节已经过时了，十月初，是最后一批，现在很难找了，不过我可以帮您问问，师父。”方子业眼皮快速地闪动了几下。
按理说，老师有想吃的东西，这么好的老师，想方设法也得帮个忙。
只是过季节的山货，这还真不是想办法就能搞得到的，若是那种冰冻的，估计口味又没那么好。
“过了就算了，别费神了，我只是随口一问。别往心里去。”
“你更要上心的事情是好好帮着听竹把申请课题的前期研究做好，她属于是非名额内的博士研究生，邓勇教授一开始不同意她来就读，是因为着实课题基金有限。”
“邓勇教授本来收了的学生，再加上新来的博士研究生，肯定要保证他们先毕业，洛听竹如果想要多拿到基金做课题的话，就得她自己稍微努力一下了。”
“这是没办法的事情。其实她如果待内科，挺好的。”袁威宏转移了话题。
方子业则笑着说：“洛师妹可能是看上了我们骨科老师们的强悍肌肉，才来了我们创伤外科。”
袁威宏闻言一怔。
接着恍惚地摸了摸手表，叹了一口气：“如果原生家庭一般的孩子，有时候美貌不是幸运，还是一种原罪。”
“这就是生活啊，一地鸡毛。”
这个话题太过惆怅，方子业很难感同身受，他自己的家庭，是相对幸福的。如今父母还愿意每个月支援两千左右的生活费。
“哦，对了，子业，你如果细胞实验技术操作都比较好的话，所有的实验流程都可以一次到两次就能解决，我们经费本上，是可以节省腾挪出来一丢丢，给你和揭翰两个人，发点劳务费的。”袁威宏对方子业眨了眨眼睛。
方子业若有所思，眼珠子转了一圈。
不管是任何课题资金，给硕士研究生发一丢丢，比如说三五千的劳务费，是正常，合法、合理、合规的支出。
只是一般的经费本，不会多出来这一笔闲钱。毕竟不是每个人的每个实验流程，都可以一步到位。
是需要好几次才能够成功的，除非是熟练度非常高。
但，方子业觉得自己是有那么一丢丢可能多节省一点实验耗材费用的，如此一来，倒还真有可能一年拿个两三千的劳务费。
只是，这样一横向对比，真的是旱的旱死，涝的涝死了。
“谢谢师父。”方子业也不富裕，就不敢有多余想法了。
袁威宏则摆了摆头：“嗯！”
“经费要好好用，精打细算，该节省的地方可以节省，但不该节省的，千万不能省，严格保证无菌原则，移液管虽然贵，但该用就用，保证实验流程的严谨性。”
“省钱不是这么省的，最主要的是要把这个课题的结果做出来，稍微推动一丢丢科学的门缝儿，这就是我们拿着国家给的钱，该做的事情。”
“还有就是，揭翰如今的科研底蕴非常深厚，他申请市级、校级课题起来，与你的底蕴也都差不多，所以他后续啊，也可能会为我们团队多拿一点钱。”
“一个是课题经费，一个是课题数量，这都是好东西。”
“有钱才能好做事。”袁威宏与方子业说着，不能对外道的话。
……
门诊结束，方子业并未多耽搁，帮忙袁威宏放了白大褂后，就直接去了实验室里。
邓勇教授那边的团队虽然大，但洛听竹并不特殊，所以她没有做实验的经费，需要自己去努力，前期研究，既然求到了袁威宏这里，袁威宏还应下来了。
那么方子业作为袁威宏团队里的成员，能帮忙自然要尽量帮忙，否则的话，袁威宏也要亲自来实验室。
而，方子业来到实验室里的时候，就发现，洛听竹一直就守在实验室，从下午的两点一直到下午的六点。
比任何人都要担心实验的进度。
她做申请课题的前期实验的经费都不多，因此容不得丝毫的浪费和大意。
“方师兄，我觉得这个培养皿已经差不多可以计数了，您来看一下？”洛听竹在看到方子业到后，赶紧站起，同时把无菌检查手套、一次性套装口罩等，都已经给方子业备好。
“嗯，好，吃饭了吗？”
“我们要不先点一个外卖？”方子业进来之后，一边问。
“已经点了的，师兄。”洛听竹点头，表示自己的后勤工作做得非常到位。一心只想着细胞宝宝以及实验。
transwell实验后，就是要进行细胞计数，以客观的数据来表示肿瘤细胞的侵袭能力。
因是前期实验，因此只需要用直接计数法即可。
然后，即便是直接计数法，仍需要一定的实验步骤，才能相对客观反应——
先固定好细胞，不再让其移动。
用镊子小心取出小室，吸干上室培养基，用棉签轻轻擦拭matrigel和上室内的细胞。取新的24孔板加入4%多聚甲醛600μl，将小室放入后固定20-30min。
然后再进行细胞染色！
取出小室，吸干上室固定液，移到预先加入约800μl 0.1%-0.2%结晶紫的孔中染液的孔中，染色15-30min。除去未与细胞结合的结晶紫，用棉签轻轻擦拭小室的上侧，将非特异性结合于小室上表面的染料擦掉，以便后续镜检计数……
这一步，方子业非常期待，因为不管是别人的细胞实验，还是自己的，只要自己发现了，而且参与了实验，肯定就有学识点的收益！
两人转战到显微镜前…
*注：本文中涉及到的一些实验步骤，一部分是经简化版本，主要是完全一股脑地放上来，懂的人倒是看懂了，大部分人都没看懂，考虑到大部分书友的感受，大家看个大概即可。
总结：transwell实验是检测肿瘤细胞侵袭能力的，通过技术表示侵袭能力强弱，操作不算简单，但是一种证明能力的工具。
第53章 小爬虫
镜下，透过膜侵袭而下的细胞数量还算喜人。
再对标正常组的话，数量占据了一定优势，已经染色，可以看得出洛听竹处理过的细胞的侵袭性比正常组更强。
这样的现象，代表着洛听竹处理过的细胞宝宝，比正常的细胞宝宝，更具有攻击性。
“学识点+28.6！”
巨额学识点增加闪现时，让方子业颇觉惊愕同时，又感觉是在情理之中。
目前虽然只是前期实验，未成系统性课题，但也是新的方向，也代表着一种突破性的认证新知。
“洛师妹，你的前期实验，就只会做到transwell这一步吧？”
洛听竹此时的注意力完全都在镜中视野，回话的语气略带一丝丝的情绪：“再继续做也没有钱呀？”
可说完，她才意识到这种语气与方子业说不对，毕竟自己没有钱做实验，与方子业没有半毛钱关系。
“方师兄，谢谢啊~”洛听竹转头一笑，大部分的笑靥被遮挡，可巧而灵动的大眼睛和睫毛泛动时，满是和善，代表着它们的主人此刻很开心。
“没事儿，也得谢谢你给我机会练手，总归是没有做坏。”
“那师妹你就先统计数据，我先再去看看我复苏的细胞。”方子业没继续给洛听竹压力，再瞥两眼，没见学识点再有增加，便果断地转战到细胞培养箱。
每一步的实验流程，培养的细胞株，都是实验的原始素材，一旦进入到实验组后，之前的细胞株就成了实验素材，无法再用，需要处理掉，重新开始复苏或者培养。
方子业在做完划痕实验，证明hk2的确在骨巨细胞瘤的转移性中起着一定作用后，接下来仍然要证实的是hk2对骨巨细胞瘤侵袭性的促进作用。
洛听竹继续观察并对细胞进行计数，为申请课题而准备。
前期实验，只是实验的一部分，主要是为表达自己已经做了一部分实验，印证了自己申请课题的可行性，如今就只差钱，就能够得到结果。
但因为个人经济能力有限，无法支撑自己的课题进一步进续，需要得到校级、市级或者省一级甚至国家级的课题基金组的支持。
没有钱，单纯靠自己去做课题，无异于痴人说梦。
不管哪一种实验，实验的素材比如细胞以及要养的老鼠兔子等，比研究生本人的每月花费还要多，除非家财万贯，否则怎么可能负担得起？
一般而言，很多高校，在做人才引进时，都会提及一笔不菲的科研启动资金，这就是让你可以有钱做申请大型课题的前期研究的准备。
研究启动资金，是非常必要的，否则的话，你无法走进这个殿堂。
巧妇难为无米之炊。
洛听竹，其实也是被邓勇教授给他挪了一丢丢的研究启动资金，才让她得以做出目前的前期研究，然后以邓勇教授或者谁的名义，申请一个小课题，拿到钱，做一些基础实验，累厚自己的履历，以求证明自己的科研能力，为留院做准备。
而与洛听竹比起来，方子业这样，找一个年轻导师，在找工作上不占据任何优势的硕士研究生，一旦能够留院读博，那么年轻导师已经申请到了面上课题基金，或者青年基金，就是方子业可以大造特造的经济支柱。